Сучасна діагностика мікроспорії

С.І. Лаврушко; В.І. Степаненко

doi:10.30978/UJDVK2021-2-16

Автор(и)

С.І. Лаврушко Полтавський державний медичний університет; КП «Полтавський обласний клінічний шкірновенерологічний диспансер Полтавської обласної ради»; Медична клініка «Елітмед+», Полтава, Ukraine
В.І. Степаненко Національний медичний університет імені О.О. Богомольця, Київ, Ukraine

DOI:

https://doi.org/10.30978/UJDVK2021-2-16

Ключові слова:

мікроспорія; Microsporum canis; діагностика; полімеразна ланцюгова реакція

Анотація

Мета роботи — розробити методику сучасної молекулярно-генетичної діагностики мікроспорії у дітей на основі полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР), що дасть змогу ідентифікувати збудника Microsporum canis на рівні ДНК.

Матеріали та методи. Під спостереженням перебували 40 хворих на мікроспорію гладенької шкіри, волосистої частини голови, волосистої частини голови і гладенької шкіри. Біологічним матеріалом для дослідження слугували лусочки з гладенької шкіри та волосистої частини голови, волосся із волосистої частини голови хворих на мікроспорію. Досліджено 40 зразків біологічного матеріалу хворих на мікроспорію гладенької шкіри, мікроспорію волосистої частини голови, мікроспорію волосистої частини голови і гладенької шкіри. На першому етапі проводили видалення ДНК Microsporum canis, потім ПЛР для збільшення кількості копій ділянки ДНК за допомогою специфічних праймерів. Заключним етапом було типування 40 зразків клінічного матеріалу пацієнтів.

Результати та обговорення. Проведення ПЛР-діагностики надало змогу виявити ДНК Microsporum canis у всіх 40 зразках біологічного матеріалу хворих на мікроспорію. В нашому розробленому методі діагностики мікроспорії на основі ПЛР було використано набір двох праймерів МС (ділянки гена бета тубуліну Microsporum canis). Для внутрішнього контролю перебігу ампліфікації та якості забору біоматеріалу застосовано специфічні праймери APOE (ділянки гена аполіпопротеїну Е людини).

Висновки. З метою вдосконалення точної специфічної діагностики мікроспорії у дітей розроблено методику сучасної молекулярно-генетичної діагностики на основі ПЛР, що дало змогу ідентифікувати збудника Microsporum canis на рівні ДНК. Аналіз молекулярної структури геному Microsporum canis підтвердив, що найбільш об’єктивним методом діагностики мікроорганізмів є ПЛР. Розроблений метод ДНК-діагностики на основі ПЛР із використанням специфічних праймерів може бути включено в алгоритм виявлення Microsporum canis у людей.

Біографії авторів

С.І. Лаврушко, Полтавський державний медичний університет; КП «Полтавський обласний клінічний шкірновенерологічний диспансер Полтавської обласної ради»; Медична клініка «Елітмед+», Полтава

Лаврушко Світлана Іванівна
аспірант кафедри шкірних та венеричних хвороб Полтавського державного медичного університету, лікар-дерматовенеролог диспансерного відділення КП «Полтавський обласний клінічний шкірно-венерологічний диспансер Полтавської обласної ради», лікар-дерматовенеролог медичної клініки «Елітмед+»
36011, м. Полтава, вул. Шевченка, 23

В.І. Степаненко, Національний медичний університет імені О.О. Богомольця, Київ

Степаненко Віктор Іванович
д. мед. н., проф., зав. кафедри дерматології та венерології з курсом косметології

Посилання

Antonova SB. Modern clinical and epidemiological features of the incidence of dermatomycosis in children. Optimization of diagnostic, medical and preventive technologies (Rus). Dissertacziya [Dissertation] (Rus). Ekaterinburg; 2019:118.

Antonova SB, Ufimczeva MA. The incidence of microsporia: epidemiological aspects, modern features of the course (Rus). Pediatriya. Zhurnal imeni GN Speranskogo [Pediatrics. Journal of the name of GN Speranskii] (Rus). 2016;95(2):142-146.

Lavrushko SI. Clinical case and treatment of microsporia of the scalp and nail (Ukr). Ukrayinsky zhurnal dermatolohigii, venerolohigii, kosmetologii [Ukrainian journal of dermatology, venereology, cosmetology] (Ukr). 2020;3(78):44-49. doi:10.30978/UJDVK2020-3-44.

Lavrushko SI, Dudchenko MO. Optimization of smooth skin microsporia treatment (Ukr). Ukrayinsky zhurnal dermatolohigii, venerolohigii, kosmetologii [Ukrainian journal of dermatology, venereology, cosmetology] (Ukr). 2018;3(70):43-54. doi:10.30978/UJDVK2018-3-43.

Lavrushko SI, Stepanenko VI. Optimization of modern complex treatment of microsporia in athletes taking into account the clinical course of dermatosis (Ukr). Ukrayinsky zhurnal dermatolohigii, venerolohigii, kosmetologii [Ukrainian journal of dermatology, venereology, cosmetology] (Ukr). 2020;3(78):29-38. doi:10.30978/UJDVK2020-3-29.

Lavrushko SI, Stepanenko VI, Dudchenko MO, Pavlenko GP. Modern view on treatment of microsporia of children, taking into account the etiology, pathogenesis and features of clinical course of dermatosis (Ukr). Ukrayinsky zhurnal dermatolohigii, venerolohigii, kosmetologii [Ukrainian journal of dermatology, venereology, cosmetology] (Ukr). 2018;4(71):16-25. doi:10.30978/UJDVK2018-4-16.

Medvedeva TV, Leyna LM, Chylyna HA, Petunova YaH, Pchelyn YM. Microsporia: modern understanding of the problem (description of clinical cases and literature review) (Rus). Problemi medytsynskoi mykolohyy [Problems of medical mycology] (Rus). 2020;22(2):12-22.doi:10.24412/1999-6780-2020-2-12-21.

Mutalpiapova HZ. Problems of diagnosing sexually transmitted infections by polymerase chain reaction (Rus). Klynycheskaia medytsyna Kazakhstana [Clinical medicine of Kazakhstan] (Rus). 2011; 3-4 :22-23.

Metody molekulyarnoj genetiki i gennoj inzhenerii. Pod red. RI Salganik [Metods of molecular genetics and genetic engineering] (Rus). Novosibirsk: Nauka; 1990: 247.

Selyutina OV. Microsporia of the pubic region, diagnostic issues (Rus). Uspekhi mediczinskoj mikologii [Advances in medical mycology] (Rus). 2016;15:213-214.

Titova TN, Mavzyutov AR, Efimov GE. Comparative assessment of the information content of laboratory diagnostics methods of microsporia (Rus). Uspekhi mediczinskoj mikologii [Advances in medical mycology] (Rus). 2014;13:196-198.

Ufimczeva MA, Antonova SB, Bochkarev YuM, Nikolaeva KI, Sorokina KN, inventor. Method for differential diagnosis of microsporia of the scalp and alopecia areata in children (Rus). Patent RF [Patent RF] (Rus). N2609204. 2017; November 20.

Kharisova AR, Khismatullina ZR. Difficulties in the diagnosis of infiltrative-suppurative microsporia. Clinical case (Rus). Problemy mediczinskoj mikologii [Problems of medical mycology] (Rus). 2018;20(4):31-33.

Aruna GL, Ramalingappa B. Development and evaluation of indirect enzyme linked immunosorbent assay for the serological diagnosis of Microsporum canis infection in humans. J Mycol Med. 2018 Jun;28(2):285-8. doi: 10.1016/j.mycmed.2018.01.007.

Bergmans AM, van der Ent M, Klaassen A, Böhm N, Andriesse GI, Wintermans RG. Evaluation of a single-tube real-time PCR for detection and identification of 11 dermatophyte species in clinical material. Clin Microbiol Infect. 2010 Jun;16(6):704-10. doi:10.1111/j.1469-0691.2009.02991.x.

Ciesielska A, Stączek P. Selection and validation of reference genes for qRT-PCR analysis of gene expression in Microsporum canis growing under different adhesion-inducing conditions. Sci Rep. 2018;8(1):1197.

Didehdar M, Shokohi T, Khansarinejad B, Ali Asghar Sefidgar S, Abastabar M, Haghani I, Amirrajab N, Mondanizadeh M. Characterization of clinically important dermatophytes in North of Iran using PCR-RFLP on ITS region. J Mycol Med. 2016 Dec;26(4):345-50. doi: 10.1016/j.mycmed.2016.06.006.

Diongue K, Boye A, Bréchard L, Diallo MA, Dione H, Ndoye NW, Diallo M, Ranque S, Ndiaye D. Dermatophytic mycetoma of the scalp due to an atypical strain of Microsporum audouinii identified by MALDI-TOF MS and ITS sequencing. J Mycol Med. 2019 Jun;29(2):185-8. doi:10.1016/j.mycmed.2019.03.001.

Eckert JC, Ertas B, Falk TM, Metze D, Böer-Auer A. Species identification of dermatophytes in paraffin-embedded biopsies with a new polymerase chain reaction assay targeting the internal transcribed spacer 2 region and comparison with histopathological features. Br J Dermatol. 2016 Apr;174(4):869-77. doi: 10.1111/bjd.14281.

Hayette MP, Seidel L, Adjetey C, Darfouf R, Wéry M, Boreux R, Sacheli R, Melin P, Arrese J. Clinical evaluation of the DermaGenius® Nail real-time PCR assay for the detection of dermatophytes and Candida albicans in nails. Med Mycol. 2019 Apr 1;57(3):277-83. doi: 10.1093/mmy/myy020.

Kalendar R, Lee D, Schulman AH Java web tools for PCR, in silico PCR, and oligonucleotide assembly and analysis. Genomics. 2011; 98(2): 137-144.

Kobylak N, Bykowska B, Kurzyk E, Nowicki R, Brillowska-Dąbrowska A. PCR and real-time PCR approaches to the identification of Arthroderma otae species Microsporum canis and Microsporum audouinii/Microsporum ferrugineum. J Eur Acad Dermatol Venereol. 2016 Oct;30(10):1819-22. doi:10.1111/jdv.13681.

Liu D, Pearce L, Lilley G, Coloe S, Baird R, Pedersen J. A specific PCR assay for the dermatophyte fungus Microsporum canis. Med Mycol. 2001 Apr;39(2):215-9. doi:10.1080/mmy.39.2.215.219.

Ross IL, Weldhagen GF, Kidd SE. Detection and identification of dermatophyte fungi in clinical samples using a commercial multiplex tandem PCR assay. Pathology. 2020; 52(4): 473-7. doi: 10.1016/j.pathol.2020.03.002

Sato T, Asahina Y, Toshima S, Yaguchi T, Yamazaki K. Usefulness of Wood’s Lamp for the Diagnosis and Treatment Follow-up of Onychomycosis. Med Mycol J. 2020;61(2):17-21. doi:10.3314/mmj.20-00004.

Uhrlaß S, Wittig F, Koch D, Krüger C, Harder M, Gaajetaan G, Dingemans G, Nenoff P. Do the new molecular assays-microarray and realtime polymerase chain reaction-for dermatophyte detection keep what they promise? Hautarzt. 2019 Aug;70(8):618-26. doi:10.1007/s00105-019-4447-z.

Witkowska E, Jagielski T, Kamińska A. Genus- and species-level identification of dermatophyte fungi by surface-enhanced Raman spectroscopy. Spectrochim Acta A Mol Biomol Spectrosc. 2018 Mar 5;192:285-90. doi:10.1016/j.saa.2017.11.008.

Ye F, Li M, Zhu S, Zhao Q, Zhong J. Diagnosis of dermatophytosis using single fungus endogenous fluorescence spectrometry. Biomed Opt Express. 2018 May 21;9(6):2733-42. doi:10.1364/BOE.9.002733.

Zhan P, Liu W. The Changing Face of Dermatophytic Infections Worldwide. Mycopathologia. 2017 Feb;182(1-2):77-86. doi:10.1007/s11046-016-0082-8.