Вплив поліпептида Wharton Jelly Peptide Р199 на функціональний стан фібробластів і мезенхімальних стовбурових клітин шкіри

Автор(и)

  • Y. O. Denis ДУ «Інститут геронтології імені Д. Ф. Чеботарьова НАМН України», Київ, Ukraine
  • T. B. Papurinа Папуріна Тетяна Борисівна, ННЦ «Інститут біології і медицини», Київ, Ukraine
  • O. K. Koliada ДУ «Інститут геронтології імені Д. Ф. Чеботарьова НАМН України», Київ, Ukraine
  • E. Tester ABG Lab, Джерсі-Сіті, United States

DOI:

https://doi.org/10.30978/UJDVK2018-1-48

Ключові слова:

фібробласти, мезенхімальні стовбурові клітини, поліпептид P199, Wharton Jelly Peptide Р199, sh­Oligopeptide­72, шкіра, диференціювання, старіння

Анотація

Мета роботи — визначити вплив sh­Oligopeptide­72 (Wharton Jelly Peptide Р199) на активність та рухливість мезенхімальних стовбурових клітин шкіри (МСК) та фібробластів in vitro.

Матеріали та методи. Первинну культуру фібробластів дерми та МСК отримали від здорових донорів віком 40 років. Метаболічну та проліферативну активність клітин досліджували за допомогою МТТ­тесту і тесту «загоєння рани». Вивчено концентрації поліпептиду від 1 до 1000 нг/мл.

Результати та обговорення. Wharton Jelly Peptide Р199 у діапазоні концентрацій 1—1000 нг/мл не виявляє ні токсичного, ні стимулювального ефекту на диференційовані фібробласти. Однак МСК дерми людини виявилися чутливими до дії поліпептиду P199. Препарат у концентрації 1—2 нг/мл стимулює метаболічну активність МСК. Виявлено диференційовану дію препарату на міграційну активність. Показано стимулювальну дію на рухливість МСК дерми, але не зрілих фібробластів дерми.

Висновки. Wharton Jelly Peptide Р199 стимулює метаболічну, проліферативну та міграційну активність МСК дерми людини. Щодо фібробластів шкіри таких ефектів не виявлено.

Біографії авторів

Y. O. Denis, ДУ «Інститут геронтології імені Д. Ф. Чеботарьова НАМН України», Київ

Деніс Євгеній Олександрович, мол. наук. співр. лабораторії епігенетики ДУ «Інститут геронтології імені Д. Ф. Чеботарьова НАМН України»
04114, м. Київ, вул. Вишгородська, 67

T. B. Papurinа, Папуріна Тетяна Борисівна, ННЦ «Інститут біології і медицини», Київ

студентка 5 курсу кафедри генетики ННЦ «Інститут біології та медицини»

O. K. Koliada, ДУ «Інститут геронтології імені Д. Ф. Чеботарьова НАМН України», Київ

Коляда Олександр Костянтинович, мол. наук. співр. лабораторії епігенетики ДУ «Інститут геронтології імені Д. Ф. Чеботарьова НАМН України»

E. Tester, ABG Lab, Джерсі-Сіті

Тестер Еліна, керівник лабораторії ABG Lab, NJ 07410, Джерсі-Сіті,

Посилання

Adams R. Metody kul’tury kletok. M.: Мir, 1983:263 (In Rus).

Kvetnoi I, Smirnova I. MESO-WHARTON: Issledovanie ekspresii signal’nykh molekul peptida P199. Nuvel’ Estetik. 2014;3(85):1-4 (In Rus).

Cherepovich VS, Volochnik EV, Antonenko EV. Optimizatsiya kriticheskikh parametrov MTT-testa dlya otsenki kletochnoi ilekarstvennoi tsitotoksichnosti. Meditsinskii zhurnal. 2006;2:106-108 (In Rus).

Boquest A, Shahdadfar A. Isolation of stromal stem cells from human adipose tissue. Methods Mol Biol. 2006:35-46. doi: 10.1385/1-59745-005-7:35.

Campisi J. The biology of replicative senescence. Burop Cancer. 1997;33:703-709. doi: 10.1016/S0959-8049(96)00058-5.

Dimri GP, et al. A biomarker that identifies senescent human cells in culture and in aging skin in vivo. Proc Natl Acad Sci USA. 1995;92(20):9363-9367.

Freshney RI. Culture of Animal Cells: A Manual of Basic Technique and Specialized Applications. 3rd Edition. New York: Wiley-Blackwell, 1993:?????

Hall BM, et al. Aging of mice is associated with p16(Ink4a)- and β-galactosidase-positive macrophage accumulation that can be induced in young mice by senescent cells. Aging (Albany NY). 2016;8(7):1294-1315. doi: 10.18632/aging.100991.

Haudenschild CC, et al. Endothelial regeneration. II. Restitution of endothelial continuity. Lab Invest. 1979;41:407-418.

Joel A Aronowitz, Ryan A Lockhart, Cloe S Hakakian. Mechanical versus enzymatic isolation of stromal vascular fraction cells from adipose tissue. Springerplus. 2015;4:713. doi: 10.1186/s40064-015-1509-2.

Li T, Xia M, Gao Y, Chen Y., Xu Y. Human umbilical cord mesenchymal stem cells: an overview of their potential in cell-based therapy. Expert Opin Biol Ther. 2015;15(8):1-14. doi:10.1517/14712598.2015.1051528.

Liang C-C, Park A, Guan J-L. In vitro scratch assay: a convenient and inexpensive method for analysis of cell migration in vitro. Nat Protoc. 2007;2:329-333. doi: 10.1038/nprot.2007.30.

Mosmann T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays. J Immunol Methods. 1983;65:55-63.

Shekhvatova AS, Durnova AO, Kvetnoi IM, et al. The expression of signaling molecules under the influence of P199 peptide in Meso-Wharton preparation, Inekts. Metody Kosmetol. 2013;4:38-46.

Srirama G, Bigliardia PL, Mei Bigliardi-Qi M Fibroblast heterogeneity and its implications for engineering organo­typic skin models in vitro. Eur J Cell Biol. 2015:1-30. doi: 10.1016/j.ejcb.2015.08.001.

Tonnard P, Verpaele A, Peeters G, et al. Nanofat grafting: Basic Research and clinical applications. Plast Reconstr Surg. 2013;132:1017-1026. doi: 10.1097/PRS.0b013e31829fe1b0.

Wilkinson PF, Millington R. Skin (Digitally printed version ed.). Cambridge: Cambridge University Press, 2009:49-50.

Young HE., Duplaa C, et al. Clonogenic analysis reveals reserve stem cells in postnatal mammals. I. Pluripotent mesenchymal stem cells. Anat Rec. 2001;263:350-360. doi: 10.1002/ar.1112.

##submission.downloads##

Номер

№ 1 (2018)

Розділ

Наукові дослідження